4-Nitrofenil béta-D-galaktopiranosida CAS:200422-18-0

Éfék: ONPG nyaéta substrat anu khusus dianggo pikeun ngadeteksi ayana sareng aktivitas énzim β-galaktosidase. Nalika énzim β-galaktosidase aya sareng aktip, éta ngabagi ONPG jadi dua produk: o-nitrofenol sareng turunan galaktosa. Pembebasan o-nitrofenol ngahasilkeun parobahan warna konéng, anu tiasa diukur nganggo spektrofotometer.

Aplikasi: ONPG gaduh sababaraha aplikasi dina panalungtikan biologi molekuler sareng biokimia:

Nangtukeun aktivitas β-galaktosidase: ONPG umumna dianggo pikeun ngukur sareng ngitung aktivitas énzim β-galaktosidase. Laju formasi o-nitrofenol, anu sabanding langsung sareng aktivitas énzim, tiasa diukur sacara spéktrofotometri.

Éksprési jeung pangaturan gén: ONPG mindeng dipaké dina ékspérimén nu patali jeung éksprési gén jeung studi pangaturan. Ieu mindeng dipaké dina uji protéin fusi, saperti sistem fusi lacZ nu ilahar dipaké, pikeun nalungtik éksprési gén nu dikawasa ku promotor spésifik. Aktivitas béta-galaktosidase nu diukur maké ONPG méré wawasan kana tingkat éksprési gén.

Panyaringan pikeun aktivitas β-galaktosidase: ONPG tiasa dianggo salaku metode panyaringan kolorimetri dina téknologi DNA rekombinan pikeun ngaidentipikasi ayana sareng fungsi gén LacZ, anu ngodekeun β-galaktosidase. Metode panyaringan ieu ngabantosan dina ngaidentipikasi klon anu ngandung gén anu dipikaresep.

Ulikan kinétika énzim: ONPG ogé kapaké dina nalungtik kinétika énzim β-galaktosidase. Ku cara ngukur laju réaksi énzim-substrat dina konsentrasi substrat anu béda-béda, dimungkinkeun pikeun nangtukeun parameter kinétik sapertos konstanta Michaelis-Menten (Km) sareng laju réaksi maksimum (Vmax).